公司細(xi)胞現貨供(gong)應，質量有保證(zheng)、實驗效果好，我司為您提供(gong)免(mian)費代測服務，同(tong)時(shi)提供(gong)最(zui)新(xin)價格、說明書、規格、用途(tu)、實驗原理(li)等(deng)相關操作說明。

中文名稱：MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒

英文名稱：MTS Cell Proliferation And Cytotoxicity Detection Kit

產品規格：500次
產品貨號(hao)：LZ-01X6321

發貨周期：1～3天

商品介紹：

實驗報告：

一、分離與培養：

    1、無菌條件(jian)下，取出1-3d 齡SD大鼠(shu)心(xin)房組(zu)織，然后用(yong)PBS將(jiang)此組(zu)織塊清洗2次，最后將(jiang)組(zu)織剪(jian)成1mm3左右大小；

    2、往組織塊(kuai)中加入4 mL酶消化(hua)液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件(jian)下消化(hua)10min，之(zhi)后用(yong)(yong)滴管吹打制成(cheng)單細(xi)胞懸液，自然沉淀并(bing)收集上清，用(yong)(yong)含10% FBS培養基終止消化(hua)后4℃放置；

    3、剩下的組織(zhi)(zhi)再(zai)加(jia)入3～4mL酶消(xiao)化液(ye)，混(hun)懸10s，置(zhi)37℃消(xiao)化10 min后，按上述方法收集上清并(bing)終止消(xiao)化后4℃放置(zhi)，重復(fu)此步驟2-3次，直至組織(zhi)(zhi)*被消(xiao)化；

    4、用200目不銹鋼(gang)篩(shai)網(wang)過(guo)濾細胞(bao)消化液(ye)，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞(bao)用含有(you)10％ FBS DMEM/F12培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基混懸，接種(zhong)于25cm2培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)箱中培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)；

    5、差速貼壁1h后(hou)，吸出培養基(ji)，按實(shi)驗需(xu)要(yao)接種(zhong)于(yu)6孔(kong)板(ban)中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

    1、待心房肌細胞(bao)生長至(zhi)80%融合(he)時，棄(qi)去培養(yang)基，用溫育的PBS沖洗細胞(bao)2次，每(mei)次10min，然(ran)后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞(bao)15min；

    2、PBS沖洗細胞2次(ci)(ci)，每次(ci)(ci)10min，然(ran)后在(zai)4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜(mo)15min；

    3、PBS沖(chong)洗(xi)細胞2次(ci)，每次(ci)10min，然后在室溫條(tiao)件下，用4% BSA封閉細胞30min；

    4、按1: 100的比(bi)例稀釋α-actin一抗，然后將其(qi)放在4℃冰箱中孵育(yu)細胞過夜；

    5、PBS沖洗(xi)細胞3次，每(mei)次10min，按1：150的比例稀釋抗(kang)(kang)α-actin的二(er)抗(kang)(kang)， 37℃條件(jian)下放置1h；

    6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

培養操作步驟：

1．用蓋片鑷將(jiang)蓋玻(bo)片自75%乙醇(chun)中(zhong)取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 

2．將蓋玻片(pian)輕輕放入6孔培(pei)養(yang)板（每(mei)孔一片(pian)）或培(pei)養(yang)皿中（每(mei)個平皿可放置2-3片(pian)）； 

3．在距離紫外燈直射(she)范圍內20-30 厘米處照射(she)2-3小時(shi)； 

4．將經(jing)過計數(shu)的細胞懸浮液移(yi)入培養(yang)板中(zhong)，使蓋(gai)玻(bo)片*浸在培養(yang)液中(zhong)； 

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 

人(ren)Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)    人(ren)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)    96T/48T    

人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑(ji)盒    人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑(ji)盒    人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人BH3結構域(yu)凋亡(wang)誘導蛋白(Bid)ELISA試(shi)劑(ji)(ji)盒    人ELISA試(shi)劑(ji)(ji)盒    96T/48T    

人B細(xi)胞(bao)κ 輕肽基因增強子核因子抑制(zhi)因子ε(Nfkbie)ELISA試(shi)劑盒(he)      人ELISA試(shi)劑盒(he)    96T/48T    

人B細胞分化因(yin)子(BCDF)ELISA試劑(ji)盒(he)      人ELISA試劑(ji)盒(he)    96T/48T    

人(ren)(ren)B細胞活化(hua)因(yin)子(zi)受體(BAFF-R)ELISA試劑盒(he)      人(ren)(ren)ELISA試劑盒(he)    96T/48T    

人B細胞連接蛋白(BLNK)ELISA試(shi)(shi)劑(ji)盒    人ELISA試(shi)(shi)劑(ji)盒    96T/48T    

人B細胞淋巴(ba)瘤因子2(Bcl-2)ELISA試(shi)劑盒    人ELISA試(shi)劑盒    96T/48T    

人B細(xi)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)    人ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)    96T/48T    

人B細(xi)胞生(sheng)長因(yin)子(BCGF)ELISA試劑盒(he)      人ELISA試劑盒(he)    96T/48T    

人(ren)B細胞受體(BCR)ELISA試劑盒    人(ren)ELISA試劑盒    96T/48T    

人B因子(BF)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)  ;  人ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)    96T/48T    

人(ren)C4結(jie)合蛋白(C4BP)ELISA試劑盒(he)    人(ren)ELISA試劑盒(he)    96T/48T    ;

人(ren)cAMP反應元件結合蛋(dan)白(CREB)ELISA試(shi)劑盒    人(ren)ELISA試(shi)劑盒    96T/48T    

人CCAAT增強子結合蛋(dan)白α(C/EBPα)ELISA試劑(ji)盒    人ELISA試劑(ji)盒    96T/48T    

人CCAAT增強子結(jie)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒(he)    人ELISA試劑盒(he)    96T/48T    

人(ren)(ren)CCAAT增強(qiang)子結合蛋(dan)白(bai)ε(C/EBPε)ELISA試(shi)劑盒(he)    人(ren)(ren)ELISA試(shi)劑盒(he)    96T/48T    

人(ren)CC趨化因子(zi)受體1(CCR1)ELISA試(shi)劑盒    人(ren)ELISA試(shi)劑盒    96T/48T    

一步法(fa)TUNEL細胞(bao)凋亡檢(jian)測試(shi)劑盒(紅色熒光)    

TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(顯(xian)色法)    

Caspase 1 活性檢測試劑(ji)盒    

Caspase 2 活性(xing)檢測試劑(ji)盒    

Caspase 3 活性檢測試劑盒(he)    

Caspase 4 活性檢(jian)測試劑盒    

Caspase 6 活性檢測試(shi)劑盒    

Caspase 8 活性檢測(ce)試劑盒    

Caspase 9 活性檢測(ce)試劑盒    

Caspase抑制(zhi)劑(Z-VAD-FMK)    

Caspase 3抑制劑(Ac-DEVD-CHO)    

線粒體膜(mo)電位檢(jian)測試劑盒    

羅丹明(ming)123    

CFDA SE細胞(bao)增殖與(yu)示(shi)蹤檢測(ce)試劑盒(he)    

細胞增殖示(shi)蹤熒光探(tan)針(zhen)(CFDA SE)    

Ad-GFP-LC3B    

Ad-mCherry-GFP-LC3B    

DAPI溶液(5mg/ml)    

DAPI染(ran)色液    

Hoechst 33258細(xi)胞藍色熒光染料    

MTS細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒Hoechst 33258染色(se)液    

Hoechst 33342細胞藍(lan)色熒光染料    

Hoechst 33342染色液    

活細胞(bao)染(ran)色液(Hoechst 33342)(100×)    

注意事項：

1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診(zhen)斷或治療。

2、螺(luo)旋蓋(gai)(gai)微量試劑管裝的試劑在開(kai)蓋(gai)(gai)前請短暫離心，將蓋(gai)(gai)和管內壁上(shang)的液體離心至管底，避(bi)免開(kai)蓋(gai)(gai)時試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試(shi)劑混用，否則會(hui)影(ying)響使用效果。

4、樣(yang)品或(huo)試劑(ji)被細菌或(huo)真菌污染(ran)或(huo)試劑(ji)交(jiao)叉污染(ran)可能會導致(zhi)錯誤的結(jie)果。

5、最好使(shi)(shi)用一次(ci)性(xing)吸頭(tou)、管、瓶或玻璃(li)器(qi)皿，可重復使(shi)(shi)用的玻璃(li)器(qi)皿必須在使(shi)(shi)用前(qian)清洗并*清除(chu)殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長時間保存(cun)可-20℃避(bi)光保存(cun)。避(bi)免反復凍融(rong)，否(fou)則將會增加空白吸收，從(cong)而影響檢測結果。最好小劑量分裝(zhuang)，用避(bi)光袋或是黑紙(zhi)、錫箔(bo)紙(zhi)包住避(bi)光。

8、用培養基(ji)或 PBS 來配制待(dai)檢測(ce)(ce)藥物(wu)。如(ru)果(guo)待(dai)測(ce)(ce)藥物(wu)有還原性，則(ze)測(ce)(ce)定(ding)不含(han)細胞，僅(jin)含(han)有 MTS 的待(dai)測(ce)(ce)藥物(wu)溶(rong)液(ye)在 490 nm處的空白吸(xi)(xi)光(guang)度。如(ru)果(guo)該吸(xi)(xi)光(guang)度很小，則(ze)可以直接(jie)加(jia)入 MTS ，如(ru)果(guo)吸(xi)(xi)光(guang)度相對較大，則(ze)需要除去(qu)培養基(ji)，并用新鮮培養基(ji)洗滌(di)細胞兩(liang)次(ci)，然后加(jia)入新的 100 μl 培養基(ji)和 10 μl MTS 進行檢測(ce)(ce)。

9、細胞處理需(xu)要(yao)小心操作,盡量避免(mian)人為的(de)損傷細胞。

10、加 MTS 溶液(ye)后(hou)孵育時(shi)間的(de)長短根據細胞的(de)類(lei)型和(he)細胞的(de)密度等實驗情(qing)況而定，對于(yu)大多數情(qing)況孵育 1 小時(shi)即(ji)可，白細胞需(xu)要(yao)培養(yang)較長時(shi)間。

11、如果不(bu)是使(shi)用 96 孔板(ban)檢測，MTS 溶(rong)液的用量相應等比例增加即可(ke)。